- 半干转液
Abcam公司 General western blot protocol 推荐使用0.04%SDS半干转液。
| 成分 | 浓度 | 整理后浓度 |
|---|---|---|
| Trisbase | 48mM | 5.8g/L |
| Glycine | 39mM | 2.9g/L |
| Methanol | 20% | 200ml/L |
| SDS | 0.04% | 0.4g/L |
小分子量蛋白如内参β-actin使用无SDS的即可,加SDS容易转过。
大分子量可将SDS浓度调至0.1%。
- 半干转条件
半干转条件
表面积根据阳极滤纸面积计算得来,与滤纸上的胶数量无关。
使用恒流模式半干转。
| 电流密度 | 时间 |
|---|---|
| 0.8 mA/cm2 | 1-2h |
| 1.2 mA/cm2 | 1h |
| 2.5 mA/cm2 | 30-45min |
| 4.0 mA/cm2 | 10-30min |













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