文献来源：2024-Molecular cancer- Discovery of vitexin as a novel VDR agonist
that mitigates the transition from chronic intestinal inflammation to colorectal cancer
背景：
牡荆碱（Vitexin），亦称“牡荆素；黄酮苷的主要成分之一。化学式C21H22O10。1967年在茶树新梢中检出。亮黄色结晶。熔点253℃。易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯及热水中，水溶液呈深绿黄色。是绿茶汤色的重要成分之一。
主要研究内容总结：
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VDR在慢性结肠炎向结肠癌转化中的作用
- VDR缺失加速慢性结肠炎向结肠癌的转化，与巨噬细胞极化（M2型增多）相关。
- 通过构建骨髓特异性VDR敲除小鼠（VDRΔMΦ），证实VDR缺失导致更严重的结肠炎症和肿瘤进展。
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Vitexin作为新型VDR激动剂的机制
- Vitexin直接结合VDR的配体结合域（LBD），促进其核转位并增强转录活性（如激活CYP24A1启动子）。
- 通过CETSA、DARTS、SPR、分子对接等实验验证vitexin与VDR-LBD的结合，关键结合位点为THR287。
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VDR/PBLD通路调控巨噬细胞极化
- Vitexin通过VDR上调PBLD基因表达，促进巨噬细胞向M1型极化，抑制M2型极化。
- ChIP-seq和双荧光素酶报告实验证实VDR直接结合PBLD启动子区（-310/-290 bp）。
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体内外模型验证
- 在AOM/DSS诱导的中期CAC小鼠模型中，vitexin通过VDR/PBLD通路抑制肿瘤进展，改善结肠病理。
- 骨髓特异性VDR敲除小鼠中，vitexin的保护作用消失，证实其依赖VDR。
每张图的核心内容：
图1
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- 主题：VDR在慢性结肠炎癌变中的关键作用。
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内容：
- AOM/DSS诱导的中期CAC模型（36天），结肠缩短且远端出现肿瘤。
- 模型组VDR蛋白表达显著降低，巨噬细胞极化（M2型增多）与炎症癌变相关。
- 骨髓特异性VDR敲除（VDRΔMΦ）小鼠显示更严重的体重下降、DAI评分升高及结肠病理损伤。
图2
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- 主题：Vitexin直接靶向VDR并与其LBD结构域结合。
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内容：
- CETSA和DARTS实验显示vitexin稳定VDR蛋白。
- 免疫荧光和pull-down实验证实vitexin与VDR-LBD结合，SPR和ITC测定结合亲和力（KD=34.67 μM）。
- 分子动力学模拟揭示THR287是vitexin结合的关键位点，突变T287A消除结合能力。
图3
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- 主题：Vitexin促进VDR核转位并增强转录活性。
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内容：
- Vitexin浓度依赖性增加VDR mRNA及核内VDR蛋白（免疫荧光和核质分离实验）。
- 双荧光素酶报告实验显示vitexin激活VDR对CYP24A1启动子的转录活性，ChIP-PCR验证VDR结合CYP24A1。
图4
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- 主题：肿瘤微环境中vitexin促进VDR核转位。
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内容：
- 肿瘤细胞（CT26/HCT116）与巨噬细胞共培养模型中，vitexin逆转肿瘤微环境导致的VDR下调。
- RNA-seq显示vitexin调控炎症相关基因，恢复核内VDR水平（Western blot和免疫荧光）。
图5
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- 主题：Vitexin依赖VDR调控巨噬细胞M1极化。
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内容：
- 共培养模型中，vitexin上调M1标志物（iNOS、IL-1β、TNF-α），下调M2标志物（CD206、ARG1）。
- VDR敲除后，vitexin对巨噬细胞极化的调控作用消失（流式细胞术和qPCR验证）。
图6
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- 主题：VDR/PBLD通路介导巨噬细胞极化调控。
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内容：
- ChIP-seq和双荧光素酶实验发现VDR直接结合PBLD启动子区（-310/-290 bp）。
- 敲低PBLD后，vitexin无法诱导M1极化，证实PBLD是VDR下游关键效应分子。
图7
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- 主题：Vitexin依赖VDR/PBLD通路缓解CAC进展。
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内容：
- 在VDRflox小鼠中，vitexin改善结肠长度、肿瘤负荷及病理损伤；VDRΔMΦ小鼠中保护作用消失。
- 免疫组化显示vitexin上调结肠VDR和PBLD表达，抑制增殖标志物PCNA。
关键结论：
Vitexin通过靶向VDR并激活VDR/PBLD通路，促进巨噬细胞M1极化，从而抑制慢性结肠炎向结肠癌的转化。这一机制为开发新型VDR激动剂治疗炎症相关性癌症提供了理论依据。
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