1、配pcr体系（1+0.3+0.3+10+8.4=20）：
CDE+阴性对照；K7TF2八个样+阳性、阴性对照；BAK1（CEBAK1四个样+NEBAK1九个样）13个样+阳性、阴性对照；GRF3（CEGRF3四个样+NEGRF3二十二个样）26个样+阳性、阴性对照；221-TOC1二十二个样+阳性、阴性对照。
2、跑pcr
加完模板后，第一步要用机器摇匀！（今天下午做的pcr忘记了，警告）然后预变性94℃5分钟；变性94℃30s，退火55℃30s，延伸72℃2min，33个循环；终延伸72℃5min（根据模板长度按照1kb/min设置）；20℃3min。
3、制胶
戴乙腈手套，放透明板，放制胶梳，每50孔（满板）60mL计，称取的琼脂糖按照1%计，微波炉加热至澄清为止。加微量溴化乙锭（EB）出现红色即可，倒板。
4、跑胶
排枪点5微升的样，点2501红盖Marker，设置电流电压200，确认正负极（黑负红正），然后启动，跑15分钟停即可。
5、紫外显影照相
启动电脑程序，透射紫外，其他参数设置清晰后，照片保存至F盘悦姐文件夹。
6、Problem：结果不乐观。阳性对照条带很弱，有的根本就没有跑出条带！大部分样的条带都很弱！
再次“重做”！这次怀疑可能是引物的原因，换新的引物，直接用悦姐提取的DNA来做。（悦姐的板用保鲜膜封好了，要在超净工作台打开，我又忘记了！）
新引物处理方法：先离心，后根据参数×100确定加入水的量，开一个小口加入，后轻弹混匀即可。
7、其他工作：跑蛋白
原理见生物化学课本57页或链接https://m.baidu.com/sf_edu_wenku/view/9a5f35fddc3383c4bb4cf7ec4afe04a1b071b0c0原理
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