实验复盘㈡------连接&转化

作者: Han_zh | 来源:发表于2020-06-09 22:12 被阅读0次

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利用ClonExpress®II One Step Cloning Kit 非连接酶依赖型单片段快速克隆试剂盒

ClonExpress®技术是一种高效的 DNA 无缝克隆技术，可将插入片段定向克隆至任意载体的任意位点。

Prepare：
提前打开制冰机
连接PCR反应程序是37℃，30min（切记盖温是37℃）
LB液体和LB固体培养基
Kan抗生素（100ml LB培养基+100μLKan）
大肠杆菌感受态细胞（克隆感受态细胞）--Trans1-T1 Phage Resistant Chemically Competent Cell
37℃、200rpm摇床

1. DNA重组反应（ClonExpress II One Step Cloning Kit）

于冰上配制反应体系

连接体系.png
使用移液器轻轻吸打混匀，短暂离心将反应液收集至管底
PCR37℃反应30min

2. 重组产物转化

诺唯赞连接试剂.png

转化步骤.png

无缝克隆.png

微信截图_20200908222038.png

Step2.png

ClonExpress®II One Step Cloning Kit

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