参考：
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15349956/
我们评估了基于5型腺病毒(Ad5)的疫苗制剂的稳定性，以确定在4℃长期储存期间稳定的液体制剂。通过确定储存期间的主要理化灭活途径，Ad5的制剂设计有特定的药用辅料，从而大大提高了稳定性。例如，结果表明Ad5被非离子表面活性剂和防冻剂以及已知抑制自由基氧化的赋形剂稳定。非离子表面活性剂对于防止腺病毒在储存过程中吸附到玻璃表面是必要的，并且需要冷冻保护剂来防止冻融诱导的病毒灭活。在含有蔗糖作为冷冻保护剂和聚山梨酯-80作为非离子表面活性剂的基础配方(A105)中，金属离子催化的自由基氧化是Ad5失活的重要机制。自由基氧化抑制剂乙醇和组氨酸，结合金属离子螯合剂乙二胺四乙酸(EDTA)，被确定为Ad5的有效稳定剂。阿伦尼乌斯稳定性数据图与一级灭活机制一致，在不存在和存在自由基氧化抑制剂的情况下，病毒灭活的表观活化能分别为26.5 +/- 0.9和28.7 +/- 0.6千卡/摩尔。制剂酸碱度的优化，以及乙二胺四乙酸和乙醇的浓度，允许确定进一步提高长期储存稳定性的制剂。例如，优化液体制剂(A195)中的Ad5在4℃储存24个月后丧失了< 0.1 logs的传染性。在A195中配制的表达HIV-1 gag (MRKAd5gag)的重组基于Ad5的人类免疫缺陷病毒(艾滋病毒)候选疫苗的免疫原性被证明与在A105中配制的相同疫苗相当。因此，使用乙二胺四乙酸、乙醇和组氨酸不会显著改变疫苗在小鼠体内的免疫原性。鉴定4摄氏度的稳定液体制剂应能显著提高Ad5作为疫苗和基因治疗载体的效用。
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