WB

Image lab一般是配套分析使用bio rad机器曝光的图片（SCN格式的图片）

UVP有自己的分析软件，也可以进行灰度值计算，但是该软件没有mac版本

Image J可以处理灰度值也可以将条带拉直处理

• PS处理：

  • 新建：A4纸
  • 将要处理的WB图片直接拖入进入“ps”
  • 选择“矩形工具”，根据条带大小框选合适大小（选择固定大小）
  • 然后框选合适大小后---选择“选择工具”，将裁剪的部分复制（control+C）到新的A4文件中。(若不能有效复制，则注意是否没有选中图层)
  • 选择“编辑”-“描边”-“3-4像素”大小即可

• image J处理：

  • 设置参数：设置定量参数。Analyze→Set Measurements。在弹出的对话框中勾选Area、Mean gray value、Min & max gray value、Integrated density。
  • 设置单位。Analyze→Set Scale。在弹出的对话框“Unit of length”后面填上“pixels”，其他的不用改动。
  • 打开图片：file-open
  • 转换格式：image-type-8-bit
  • 清除背景：“process” --- "subtract background" --- "Rolling ball radius"为50，并勾上Light background，点击OK即可。
  • 翻转：“edit” --- "invert"
  • 框选目标区域：选择矩形选框工具框选出需要分析的所有条带。
  • 点击菜单栏Analyze下拉出现的measurement，即可弹出你选定区域的灰度统计值，然后手动选择下一个。
  • Result-file-save as/也可以复制量化数据到excel表中。

• GraphPad：

  • 新建“column”
  • 输入数值点击“data”,选择样式，点击“mean with SEM”